在某种酶的反应体系中加入一种小分子抑制剂,发现酶活性受到抑制。请用两种实验来判断该小分子是可逆抑制剂还是不可逆抑制剂。要求写出实验设计的依据和实验方法,预测实验结果并得出实验结论。
答:(1)依据:可逆抑制剂与酶分子以非共价键结合可以采用透析或凝胶过滤层析去除该抑制剂,酶活性可恢复;不可逆抑制剂与酶分子以共价键结合,采用上述方法不能去除该抑制剂,酶活性不能恢复。(2)透析:对该酶和抑制剂的混合物进行透析,测定透析后酶的活性。若酶活性能恢复,则该小分子为可逆抑制剂;若不能恢复,则是不可逆抑制剂。(3)凝胶过滤层析:对该酶和抑制剂的混合物进行凝胶过滤层析,测定层析后酶的活性。若酶活性能恢复,为可逆抑制剂;若不能恢复,则是不可逆抑制剂。
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